Endomicroscópio confocal a laser com scanner MEMS distal para real

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Dec 02, 2023

Endomicroscópio confocal a laser com scanner MEMS distal para real

Relatórios Científicos volume 12,

Scientific Reports volume 12, Número do artigo: 20155 (2022) Citar este artigo

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A endomicroscopia confocal a laser é uma metodologia emergente para realizar biópsia óptica em tempo real. Imagens de fluorescência com qualidade histológica podem ser coletadas instantaneamente do epitélio de órgãos ocos. Atualmente, a varredura é realizada na extremidade proximal dos instrumentos baseados em sonda usados ​​rotineiramente na clínica, e a flexibilidade para controlar o foco é limitada. Demonstramos o uso de um scanner de ressonância paramétrica embalado na extremidade distal do endomicroscópio para realizar deflexões laterais de alta velocidade. Uma abertura foi gravada no centro do refletor para dobrar o caminho óptico. Este projeto reduziu as dimensões do instrumento para 2,4 mm de diâmetro e 10 mm de comprimento, permitindo a passagem frontal através do canal de trabalho de um endoscópio médico padrão. Um conjunto de lente compacto fornece resolução lateral e axial de 1,1 e 13,6 μm, respectivamente. Uma distância de trabalho de 0 μm e um campo de visão de 250 μm × 250 μm foram alcançados em taxas de quadros de até 20 Hz. A excitação a 488 nm foi entregue para excitar a fluoresceína, um corante aprovado pela FDA, para gerar alto contraste tecidual. O endomicroscópio foi reprocessado usando um método de esterilização clinicamente aprovado por 18 ciclos sem falhas. Imagens de fluorescência foram coletadas durante a colonoscopia de rotina da mucosa colônica normal, adenomas tubulares, pólipos hiperplásicos, colite ulcerativa e colite de Crohn. Células individuais, incluindo colonócitos, células caliciformes e células inflamatórias, podem ser identificadas. Características da mucosa, como estruturas de cripta, lúmens de cripta e lâmina própria, podem ser distinguidas. Este instrumento tem potencial para ser usado como acessório durante a endoscopia médica de rotina.

A endomicroscopia confocal a laser é uma modalidade de imagem emergente que está sendo desenvolvida para uso clínico como um acessório para endoscopia médica de rotina1,2,3. Esses instrumentos flexíveis acoplados a fibras podem ser usados ​​para identificar doenças no epitélio que reveste órgãos ocos, como o cólon. Essa fina camada de tecido é altamente metabolicamente ativa e é a origem de muitos processos patológicos, como câncer, infecção e inflamação. A endomicroscopia pode atingir resolução subcelular para fornecer imagens in vivo com qualidade "semelhante à histologia" em tempo real para orientar os médicos na tomada de decisões clínicas. A biópsia física do tecido incorre em risco de sangramento e perfuração. Frequentemente, muitas ou poucas biópsias são coletadas. Cada espécime ressecado aumenta o custo do procedimento. Vários dias são necessários para processar a amostra para avaliação por um patologista. Os pacientes muitas vezes sentem ansiedade enquanto esperam vários dias para que os resultados da patologia fiquem disponíveis. Em comparação, outros métodos de imagem clínica, como ressonância magnética, tomografia computadorizada, PET, SPECT e ultrassom, carecem da resolução espacial e das velocidades temporais necessárias para visualizar processos epiteliais com resolução subcelular in vivo em tempo real.

Um instrumento baseado em sonda (Cellvizio) é atualmente usado rotineiramente na clínica para realizar "biópsia óptica". O design é baseado em um feixe de fibras espacialmente coerente que coleta e transmite imagens de fluorescência4. Os núcleos das fibras individuais servem como "pinholes" para filtrar espacialmente a luz fora de foco para alcançar a resolução subcelular. A varredura é realizada na extremidade proximal usando galvos grandes e volumosos. Esta localização limita a capacidade do instrumento de controlar o foco. O estadiamento adequado dos cânceres epiteliais iniciais requer visualização abaixo da superfície do tecido para avaliar a invasão e determinar a terapia apropriada. A fluoresceína, um agente de contraste aprovado pela FDA, é injetada por via intravenosa para realçar as características estruturais do epitélio. Esses endomicroscópios têm dimensões <2,4 mm de diâmetro e podem ser passados ​​facilmente pelo canal de biópsia de endoscópios médicos padrão. Essa flexibilidade permite amplo uso clínico e independe do fabricante do endoscópio. Numerosos estudos clínicos foram realizados usando este instrumento de imagem, inclusive no esôfago, estômago, cólon e cavidade oral, para a detecção precoce do câncer. Protocolos de imagem foram estabelecidos e a segurança desse procedimento foi determinada.

1 mm19. However, this low contrast methodology is based on collection of back scattered light, and image resolution is limited by speckle artifact. Photoacoustic endomicroscopy generates in vivo images based on a rapid thermoelastic expansion in tissue following absorption of a laser pulse, and generates an acoustic wave20. This approach has demonstrated imaging depths >1 cm in human colon in vivo to monitor therapy. Contrast is generated primarily from hemoglobin in the vasculature. Multi-photon endomicroscopy generates high contrast fluorescence images when two or more NIR photons arrive at a tissue biomolecule simultaneously21. This approach can achieve imaging depths >1 mm with low phototoxicity. High intensity femtosecond laser pulses are required, and this modality has not been demonstrated clinically during endoscopy./p>400 µm by tuning the drive frequency in a regime that features mixed softening/stiffening dynamics27. In the future, vertical cross-sectional imaging may be useful for staging early cancer (T1a). A capacitive sensing circuit can be implemented to track the scanner motion and correct phase shifts28. Automated phase calibration using a sensing circuit may replace manual calibration prior to instrument use. The reliability of the instrument can be improved with use of more robust methods to seal the instrument to increase the number of reprocessing cycles. MEMS technology promises to accelerate the use of endomicroscopes to visualize the epithelium of hollow organs to diagnose disease and monitor therapy in a minimally invasive manner. With further development, this emerging imaging methodology may become a low-cost solution for use as an accessory to medical endoscopy to provide instantaneous histology and may eventually replace conventional pathological analysis./p>